Virus oncolitico ingegnerizzato riprogramma i macrofagi tumorali immunosoppressori per combattere il cancro

I macrofagi associati al tumore (TAM) possono sopprimere l'immunità antitumorale e contribuire alla resistenza ai trattamenti. Possono inoltre eliminare i virus oncolitici, limitando la viroterapia. Questo studio ha indagato se un herpesvirus ingegnerizzato potesse, al contrario, colpire i TAM che esprimono PD-L1 e riprogrammarne l'attività, mantenendo la capacità di infettare le cellule tumorali.

I ricercatori hanno innanzitutto analizzato dataset pubblici. L'analisi CIBERSORT ha mostrato un'elevata infiltrazione di macrofagi in diversi tipi di tumore, e le analisi di sopravvivenza hanno collegato una maggiore infiltrazione a una prognosi sfavorevole. I pazienti non responsivi al blocco dei checkpoint presentavano una maggiore abbondanza di TAM rispetto ai responsivi. La profilazione a singola cellula di 125.569 cellule immunitarie provenienti da 22 campioni di melanoma e 22 campioni normali ha identificato i TAM come il sottogruppo di cellule immunitarie predominante, con i punteggi di inibizione immunitaria più elevati nei tumori. CD274, il gene che codifica PD-L1, risultava sovraespresso nei macrofagi tumorali. I pazienti con sia elevata infiltrazione di macrofagi sia elevata espressione di CD274 avevano una sopravvivenza peggiore rispetto a quelli con livelli bassi di entrambi. Queste associazioni osservazionali hanno motivato un approccio mirato contro PD-L1.

Il virus ingegnerizzato, gDαPD-L1, contiene un nanocorpo anti-PD-L1 inserito nel dominio della glicoproteina D che non lega il recettore. Ha mantenuto una replicazione paragonabile a quella del virus parentale nelle cellule U-2 OS suscettibili. Nelle cellule B16-F10, non è riuscito a infettare le cellule PD-L1 knockout e ha infettato in modo più efficiente le cellule che sovraesprimono PD-L1. PD-L1-hIgG solubile ha inibito l'ingresso del virus in modo dose-dipendente e ha abolito l'effetto citotossico nel saggio riportato.

In un pannello di linee cellulari tumorali murine, gDαPD-L1 ha mostrato valori di EC50 inferiori da 4,24 a 47,90 volte rispetto a gDWT. La sua attività oncolitica era correlata ai livelli di PD-L1 piuttosto che a quelli di Nectin-1 o HVEM. Tuttavia, gli esperimenti di blocco dei recettori hanno mostrato che l'ingresso poteva dipendere maggiormente da Nectin-1 nelle cellule con sufficiente Nectin-1; PD-L1 rappresentava quindi una via di ingresso aggiuntiva e non un recettore esclusivo. Il trattamento con interferone ha aumentato l'espressione di PD-L1 e ha potenziato l'attacco virale e la citotossicità; il blocco di IFNAR1 ha ridotto l'uccisione nelle comuni cellule B16-F10, ma non in quelle che sovraesprimono PD-L1.

La didascalia della Fig. 3 fornita descrive esperimenti di crescita tumorale B16-F10 e MC38 in topi nudi, con rispettivamente 7 e 8 topi per gruppo. Tuttavia, l'estratto si interrompe nel corso di tale didascalia e non fornisce i risultati successivi dettagliati sull'efficacia negli animali né sui meccanismi immunitari. Secondo l'abstract, CAR-oHSV colpisce preferenzialmente i TAM PD-L1+ in modelli tumorali resistenti al virus e induce una riprogrammazione STING-dipendente verso un fenotipo CXCL9+. L'abstract riporta una migliore cross-presentazione degli antigeni tumorali, una risposta anti-tumorale endogena delle cellule T e una sinergia con la terapia cellulare adottiva a base di cellule T e con il blocco dei checkpoint immunitari. Questi risultati non possono essere valutati in dettaglio sulla base dell'estratto dei risultati fornito.

La fonte combina analisi osservazionali di dati di pazienti con lavoro sperimentale preclinico. Non riporta test clinici di questo virus ingegnerizzato, quindi l'efficacia terapeutica nell'uomo, il dosaggio e la sicurezza restano non stabiliti. I risultati supportano ulteriori ricerche sui virus oncolitici diretti contro PD-L1 come strategia per affrontare l'immunosoppressione mediata dai macrofagi, ma non dimostrano l'esistenza di un trattamento pronto per l'uso nei pazienti.