Tre laboratori ELISA per Shigella concordano sulle soglie anticorpali per i trial vaccinali

La shigellosi rimane una delle principali cause di malattia diarroica a livello globale, in particolare nei bambini piccoli nei paesi a basso e medio reddito. Diversi candidati vaccini contro <i>Shigella sonnei</i> sono in fase di sviluppo clinico e le IgG sieriche contro l'O-antigene del lipopolisaccaride (LPS) di <i>S. sonnei</i> sono state proposte come correlato di protezione. Una soglia protettiva di 1.600 unità era stata precedentemente stabilita utilizzando il metodo ELISA della Tel Aviv University (TAU), ma diversi gruppi di ricerca che conducono sperimentazioni vaccinali con approccio per fasce d'età decrescenti hanno sviluppato i propri protocolli ELISA interni, rendendo difficili i confronti tra studi delle risposte immunitarie in assenza di uno standard di riferimento sierico riconosciuto a livello internazionale.

Per colmare questa lacuna, ricercatori di quattro istituzioni — MHRA (Regno Unito), GSK Vaccines Institute for Global Health (Italia), Tel Aviv University (Israele) e Walter Reed Army Institute of Research (USA) — hanno condotto uno studio di bridging retrospettivo. Un pannello di 32 campioni di siero umano caratterizzati, che coprono un ampio intervallo dinamico di livelli di IgG anti-LPS di <i>S. sonnei</i>, è stato analizzato in modo indipendente da ciascun laboratorio utilizzando i rispettivi protocolli ELISA interni. I tre metodi ELISA differivano per la preparazione dell'antigene di rivestimento, il formato del saggio, gli standard di riferimento e le unità di espressione dei dati, rappresentando la variabilità reale presente tra i programmi di sperimentazione clinica attivi.

Nonostante queste differenze metodologiche, lo studio ha riscontrato un'eccellente correlazione interlaboratorio in tutti i confronti a coppie. L'analisi di regressione è stata applicata ai set di dati per derivare equazioni di adattamento che mettono in relazione matematicamente i valori anticorpali misurati dal metodo di ciascun laboratorio. Utilizzando queste equazioni, il gruppo ha calcolato i valori anticorpali equivalenti nei sistemi ELISA di MHRA e Walter Reed corrispondenti alla soglia TAU di 1.600 unità. Ciò fornisce fattori di conversione operativi che i ricercatori possono applicare per interpretare e confrontare i dati di immunogenicità provenienti da sperimentazioni che utilizzano diverse piattaforme di saggio.

Le implicazioni pratiche sono significative: le sperimentazioni vaccinali contro la Shigella con approccio per fasce d'età decrescenti — in corso o completate di recente — che testano i vaccini in gruppi d'età progressivamente più giovani, inclusa la popolazione target di lattanti, possono ora confrontare i propri dati di immunogenicità in modo quantitativamente significativo. Ciò è particolarmente importante per le strategie di immunobridging, in cui le risposte immunitarie nelle popolazioni in cui le sperimentazioni di efficacia non sono praticabili devono essere inferite dai correlati stabiliti nelle popolazioni in cui esistono dati di efficacia.

Gli autori riconoscono che questo approccio di bridging rappresenta una soluzione transitoria. La vera armonizzazione dei saggi immunologici per la Shigella è subordinata allo sviluppo e alla disponibilità di un siero di riferimento internazionale standardizzato, che consentirebbe a tutti i laboratori di calibrare i propri saggi su un riferimento comune, eliminando la necessità di studi di conversione a coppie. La dimensione del pannello di 32 campioni, sebbene sufficiente per una regressione robusta, potrebbe non catturare la piena variabilità biologica nelle popolazioni target, e le equazioni di conversione sono specifiche per le configurazioni dei saggi testati.