Gli inibitori di FTO e BTK si uniscono per bloccare la crescita e la diffusione del cancro al seno

Il tumore al seno rimane la seconda causa di morte per cancro nelle donne a livello mondiale, e la resistenza alle terapie esistenti — combinata con l'elevato potenziale metastatico — sottolinea l'urgente necessità di strategie terapeutiche migliorate. Questo studio si è concentrato su FTO (fat mass and obesity-associated protein), il primo demetilase RNA m6A scoperto, che rimuove le modificazioni N6-metiladenina dall'mRNA. Gli autori hanno confermato che FTO è altamente espresso nel tessuto tumorale del seno e promuove la crescita tumorale e la metastasi, rendendolo un bersaglio terapeutico promettente.

Per trovare il miglior partner in combinazione per l'inibitore di FTO FB23, il team ha esaminato 27 farmaci a bersaglio molecolare approvati clinicamente su linee cellulari di tumore al seno aggressivo (MDA-MB-231 e BT-549), inclusi derivati con maggiore potenziale metastatico polmonare generati attraverso passaggi seriali in vivo. Ibrutinib, un inibitore irreversibile di BTK approvato per le neoplasie delle cellule B, è emerso come il candidato principale — producendo il tasso di morte cellulare più elevato e il combination index (CI) più basso, indicando una forte sinergia piuttosto che semplici effetti additivi.

Il sequenziamento dell'RNA delle cellule trattate ha rivelato che la combinazione sopprimeva nel modo più potente i programmi trascrizionali oncogenici guidati da c-Myc e E2F1, due regolatori principali della progressione del ciclo cellulare e della crescita tumorale. Dal punto di vista meccanicistico, la combinazione di farmaci ha aumentato la metilazione m6A sugli mRNA di c-Myc e E2F1 e ne ha accelerato la degradazione, riducendo l'emivita dell'mRNA e, in ultima analisi, abbassando i livelli proteici. In modo cruciale, la sovraespressione di c-Myc o E2F1 ha rescuato le cellule dagli effetti antiproliferativi della combinazione, confermando questi fattori di trascrizione come mediatori chiave della sinergia. I saggi funzionali, tra cui la vitalità cellulare CCK-8, la sopravvivenza clonogenica, la guarigione delle ferite, l'invasione transwell e l'apoptosi Annexin V/PI, hanno tutti dimostrato un'attività superiore della combinazione rispetto a ciascun farmaco da solo.

In vivo, i topi portatori di xenotrapianti MDA-MB-231 hanno mostrato un volume e un peso tumorale significativamente ridotti quando FTO è stato silenziato tramite shRNA in combinazione con il trattamento con ibrutinib, rispetto a ciascun intervento da solo. Nei modelli di metastasi a iniezione endovenosa che utilizzavano la linea MDA-MB-231-LMF3 ad elevato tropismo polmonare, la combinazione ha ridotto drasticamente il carico metastatico polmonare e migliorato la sopravvivenza complessiva. L'analisi immunoistochimica dei tumori ha confermato la riduzione di Ki67 (proliferazione), la riduzione dell'espressione di FTO, c-Myc e E2F1, e l'aumento della caspasi-3 clivata (apoptosi).

Lo studio posiziona la combinazione dell'inibizione di FTO e BTK come una strategia di oncologia di precisione convincente, in particolare per i sottotipi aggressivi di tumore al seno triplo negativo. Prendendo di mira simultaneamente la modificazione epigenetica dell'RNA e la segnalazione chinasica, la combinazione aggira i comuni meccanismi di resistenza che emergono con gli approcci a singolo agente. Gli autori invocano l'avvio di trial clinici per valutare le combinazioni FB23-ibrutinib nelle pazienti con tumore al seno.