A Nucleofagia Elimina a PARP1 Tóxica Aprisionada, Revelando um Novo Alvo para Combater a Resistência a Medicamentos

Os inibidores de PARP representam as primeiras terapias oncológicas baseadas em letalidade sintética, aprovadas para tumores com deficiência de HR portadores de mutações em <em>BRCA1/2</em>. Seu principal mecanismo citotóxico não é simplesmente a inibição catalítica do PARP1, mas o aprisionamento físico do PARP1 na cromatina nos sítios de dano ao DNA, onde ele bloqueia as forças de replicação e causa quebras de dupla fita irreparáveis. Apesar da promessa clínica inicial, a resistência — tanto de novo quanto adquirida — é um problema significativo, com cerca de 40% das pacientes com câncer de ovário portadoras de mutação em <em>BRCA</em> apresentando resposta escassa ou nula.

Este estudo identifica um mecanismo até então não reconhecido pelo qual células cancerígenas sobrevivem ao tratamento com PARPi: a degradação autofágica seletiva do PARP1 aprisionado por meio de nucleofagia. Os autores demonstram que o tratamento com PARPi desencadeia um aumento do fluxo autofágico direcionado ao núcleo. O receptor de autofagia seletiva TEX264, localizado na interface entre o retículo endoplasmático e o núcleo, orquestra esse processo ao interagir fisicamente com o PARP1 aprisionado e recrutar a segregase AAA-ATPase p97/VCP para extraí-lo da cromatina, conectando-o em seguida ao marcador autofagossomal LC3 para degradação lisossomal.

Os experimentos principais incluíram ensaios de ligação por proximidade, co-imunoprecipitação e microscopia de fluorescência em linhagens celulares humanas tratadas com talazoparib (o aprisionador clínico de PARP1 mais potente disponível). A depleção genética do TEX264 ou a inibição farmacológica do p97 aumentou acentuadamente os níveis de PARP1 ligado à cromatina, promoveu a formação de agregados insolúveis de PARP1 e amplificou os marcadores de dano ao DNA (focos de γH2AX e 53BP1). Esses efeitos foram citotóxicos, causando estresse replicativo e morte celular mesmo em células cancerígenas deficientes em <em>BRCA1</em> e resistentes a PARPi, restaurando assim a sensibilidade ao fármaco.

O estudo demonstra ainda que a perda de TEX264 ou p97 atua em sinergia com o PARPi em ensaios de sobrevivência em colônias e em modelos de tumores em organoides ou em camundongos com resistência adquirida a PARPi, estabelecendo relevância terapêutica. É importante destacar que a via de nucleofagia parece ser seletiva para o PARP1 aprisionado e imobilizado na cromatina, e não para o PARP1 nuclear livre, sugerindo um papel de controle de qualidade na remoção de complexos aberrantes DNA-proteína do núcleo.

Em conjunto, este trabalho recontextualiza a nucleofagia como um mecanismo citoprotetor co-optado pelas células cancerígenas para sobreviver ao estresse genotóxico, e identifica o TEX264 e o p97 como potenciais alvos farmacológicos para superar a resistência aos PARPi. A combinação de inibidores de p97 (vários em ensaios clínicos) com PARPi pode representar uma estratégia racional para o tratamento de cânceres com mutação em <em>BRCA</em> resistentes à terapia convencional.