Ensaio clínico em humanos, o primeiro do tipo, testará células hepáticas reprogramadas dos próprios pacientes contra a cirrose avançada
Pesquisadores japoneses vão transplantar células progenitoras hepáticas dos próprios pacientes, reprogramadas quimicamente, na veia porta em um ensaio de segurança em humanos, o primeiro do tipo, para cirrose.
Resumo
Pessoas com cirrose descompensada que não podem receber um transplante de fígado têm poucas opções, e a sobrevida após a descompensação costuma ser de cerca de dois anos. Uma equipe japonesa está iniciando o primeiro ensaio em humanos de uma nova abordagem. Cirurgiões removem cerca de 30 gramas do próprio fígado do paciente, e cientistas de laboratório usam três moléculas pequenas para transformar células hepáticas maduras em células progenitoras expansíveis chamadas CLiPs. Após 12 a 16 semanas de cultivo e testes rigorosos de segurança, incluindo verificações de câncer oculto e de danos genéticos, cerca de 100 milhões de células são infundidas na veia porta do fígado. Apenas três pacientes com doença classe B de Child–Pugh serão tratados, e o objetivo principal é a segurança até o primeiro mês. A função hepática e os marcadores de cicatrização (fibrose) são monitorados por um ano como desfechos exploratórios. Nenhum paciente recebeu o transplante celular até o momento, portanto não há resultados. Estudos em animais, incluindo um modelo de fígado gorduroso em animais de grande porte, mostraram redução da cicatrização e ausência de tumores.
Resumo Detalhado
A cirrose descompensada é o estágio terminal da doença hepática crônica. Quando surgem ascite, sangramento varicoso ou encefalopatia hepática, a sobrevida mediana é de cerca de 2 anos sem transplante. A sobrevida histórica em um ano é de aproximadamente 80% na classe B de Child–Pugh e de 45% na classe C. O transplante é a única opção curativa, mas a escassez de doadores, o risco cirúrgico, a imunossupressão para toda a vida e regras de elegibilidade rigorosas excluem muitos pacientes. Terapias celulares anteriores, incluindo células-tronco hematopoéticas, células estromais mesenquimais e hepatócitos primários, pareceram viáveis e seguras, mas produziram benefício modesto e transitório, em grande parte porque as células não persistem nem funcionam no ambiente hostil do fígado cirrótico.
Este artigo é um protocolo, não um relatório de resultados. Ele descreve o estudo de fase I/II em humanos, o primeiro do tipo, com células progenitoras hepáticas autólogas induzidas quimicamente (CLiPs), produzidas pelo cultivo de hepatócitos maduros com três pequenas moléculas (Y-27632, A-83-01 e CHIR99021). As células resultantes são proliferativas e bipotentes, ou seja, podem amadurecer em direção a hepatócitos ou a células epiteliais biliares. Como o microambiente cirrótico pode direcionar esse destino, os autores afirmam abertamente que não sabem se as CLiPs humanas transplantadas amadurecerão em hepatócitos com a mesma eficiência observada em animais, e que este estudo não pode responder diretamente a essa questão.
A fabricação e a triagem de segurança são centrais no desenho do estudo. Cerca de 30 g de tecido hepático são retirados por laparoscopia do segmento 3 ou 5/6 e expandidos por 12–16 semanas em um centro certificado de processamento celular no Nagasaki University Hospital. Os pacientes passam primeiro por tomografia computadorizada com contraste e ressonância magnética com ácido gadoxético, e o tecido coletado não deve apresentar malignidade na histologia. A análise de variação do número de cópias compara os hepatócitos de partida com um intermediário de CLiP. Um painel de genes do câncer é realizado no DNA do sangue, nos hepatócitos de partida e no intermediário. Testes de esterilidade, micoplasma, endotoxina, viabilidade e marcadores de superfície condicionam a liberação do produto. Evitam-se passagens prolongadas, e o número-alvo de células foi atingido até a passagem 6.
A base pré-clínica abrange vários modelos. CLiPs de rato reduziram a fibrose e a ALT em MASH induzida por dieta. CLiPs humanas, incluindo as derivadas de fígado cirrótico, amadureceram em células positivas para albumina, reduziram AST e ALT e diminuíram genes de colágeno e fibrose em camundongos imunodeficientes com MASH. As CLiPs também melhoraram a regeneração após hepatectomia parcial em camundongos idosos. Em um modelo suíno de MASLD, o transplante autólogo por via venosa portal foi bem tolerado e reduziu a esteatose, a ativação das células estreladas e o colágeno, sem formação de tecido ectópico nem tumorigênese. Um ponto de cautela é que 2 de 3 linhagens de CLiPs de rato apresentaram aneuploidia e translocações nas passagens 15–20.
Serão incluídos três adultos de 20 a 80 anos com cirrose Child–Pugh classe B (pontuação de 7–9 em duas avaliações com intervalo mínimo de 90 dias). As causas elegíveis são HBV em terapia estável, HCV após resposta virológica sustentada, MASH ou doença associada ao álcool com pelo menos 6 meses de abstinência. Os critérios de exclusão incluem câncer de fígado prévio ou suspeito, trombose da veia porta, ascite moderada ou grave, bilirrubina igual ou superior a 5,0 mg/dL e eGFR igual ou inferior a 30. A dose-alvo é de 1 × 10^8 células (mínimo de 5 × 10^7) em 100 mL, infundidas em cerca de 10 minutos por dissecção da veia ileocólica. Um comitê independente deve revisar os dados de segurança de 1 mês do primeiro paciente antes que os demais prossigam.
O desfecho primário são os eventos adversos e as deficiências do produto desde a coleta do tecido até 1 mês após o transplante. A segurança é acompanhada por 12 meses. Os desfechos exploratórios incluem a variação de Child–Pugh e ALBI, MELD, biomarcadores de fibrose (P-III-P, ácido hialurônico, M2BPGi, Pro-C3), elastografia, FIB-4, testes de encefalopatia e ascite. Sem grupo controle, sem cálculo do tamanho amostral e sem teste de hipóteses, não é possível inferir eficácia. A dose é uma estimativa translacional conservadora (cerca de 0,1% de proporção células/fígado), e não uma dose comprovadamente eficaz nem a dose máxima tolerada. No momento da submissão, o recrutamento havia começado, mas nenhum participante havia sido transplantado.
Principais Descobertas
- Planned enrollment is only 3 adults with Child–Pugh class B decompensated cirrhosis (score 7–9 on two assessments at least 90 days apart) who are not transplant candidates
- Each patient provides about 30 g of liver tissue, and manufacturing of the CLP-001 cell product takes 12–16 weeks
- Target dose is 1 × 10^8 cells in 100 mL infused over about 10 minutes into the portal vein, with a minimum acceptable dose of 5 × 10^7 cells
- Background survival without transplantation is poor: about 80% one-year survival in Child–Pugh B, 45% in class C, and a median of about 2 years after decompensation
- In earlier rat work, 2 of 3 CLiP lines showed aneuploidy and translocations at passages 15–20, so the clinical process avoids prolonged passaging and reaches the target cell number by passage 6
- In a porcine MASLD model, autologous portal venous CLiP transplantation reduced steatosis, stellate cell activation and collagen with no tumorigenesis or ectopic tissue formation
- Primary endpoint is safety from tissue harvest to 1 month after transplant, with follow-up to 12 months, and no participant had been transplanted at submission
Metodologia
Este é o protocolo de um estudo de fase I/II, de centro único (Hospital Universitário de Nagasaki), aberto, de braço único e de primeira administração em humanos, conduzido sob a Lei de Segurança da Medicina Regenerativa do Japão (jRCTa070250146). O estudo incluirá 3 pacientes, sem grupo de controle concorrente, sem cálculo formal do tamanho da amostra e sem teste de hipóteses. Um comitê de segurança independente deverá revisar os dados do primeiro mês do primeiro paciente antes que novos participantes sejam incluídos. O acompanhamento inclui avaliações com o paciente internado até o dia 7 após o transplante e consultas ambulatoriais aos 1, 3, 6 e 12 meses.
Limitações do Estudo
Os autores observam que o ensaio é exploratório, com apenas três pacientes, sem grupo controle e sem testes estatísticos formais, de modo que os achados de eficácia são apenas descritivos. O destino das CLiPs transplantadas no fígado humano não pode ser estabelecido diretamente, e a dose é uma estimativa conservadora, e não uma dose eficaz ou dose máxima tolerada validada. O cariótipo realizado em passagens iniciais não comprova a estabilidade genômica após cultivo por períodos mais longos. O trecho fornecido não inclui uma declaração de conflito de interesses.
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