Combinação de Inibidores de BCL-2 e mTOR tem como Alvo o Câncer Colorretal com Mutação em *PIK3CA*

Mutações no gene *PIK3CA* ocorrem em até 18% dos cânceres colorretais e ativam a sinalização a jusante de AKT e mTOR, promovendo sobrevivência celular, proliferação e resistência à apoptose. Apesar do interesse clínico, nenhum inibidor da via PI3K obteve aprovação do FDA para o câncer colorretal como terapia padrão de cuidado, e a resistência a inibidores isolados de PI3K/mTOR tem sido um obstáculo persistente em múltiplos ensaios clínicos. O braço Z1F do estudo NCI-MATCH demonstrou apenas 16% de taxa de resposta global com copanlisib em monoterapia, evidenciando a necessidade urgente de estratégias combinadas eficazes.

Para identificar fármacos que potencializam a atividade do copanlisib, os pesquisadores desenvolveram um inovador rastreamento farmacológico de alta performance utilizando organoides de câncer derivados de camundongos (MDCOs) provenientes de camundongos com mutações em *Apc*/*Pik3ca*. Um painel de 96 fármacos oncológicos com mecanismos diversos foi testado isoladamente e em combinação com copanlisib (200 nmol/L). O rastreamento empregou múltiplos métodos analíticos: variação relativa no diâmetro dos organoides, sistema de pontuação visual de resposta, percentual de organoides eliminados por poço e comparação estatística com o copanlisib em monoterapia. O navitoclax (ABT-263), um BH3-mimético que inibe BCL-2, BCL-xL e BCL-w, emergiu como o principal candidato em todas as métricas analíticas.

A combinação de navitoclax com inibidores de PI3K/mTOR foi validada em um conjunto abrangente de modelos pré-clínicos. In vitro, a combinação aumentou significativamente a apoptose (mensurada pela caspase-3/7 clivada) em linhagens celulares e organoides de câncer colorretal com mutação em *PIK3CA*, em comparação a cada agente isolado. In vivo, modelos de xenoenxerto em camundongos e modelos murinos geneticamente modificados tratados com navitoclax associado a dactolisib, sapanisertib ou copanlisib apresentaram redução tumoral significativamente maior do que com os agentes isolados, com inibição do crescimento tumoral e regressão observadas nos grupos de combinação. A colonoscopia murina confirmou redução da oclusão luminal nos animais tratados.

Para determinar qual membro da família BCL-2 impulsiona a resposta, os pesquisadores testaram inibidores seletivos: venetoclax (específico para BCL-2) e WEHI-539 (específico para BCL-xL). A inibição de BCL-xL reproduziu o potenciamento observado com navitoclax, enquanto a inibição isolada de BCL-2 não o fez, identificando BCL-xL como o alvo primário. Estudos em organoides de câncer derivados de pacientes (PDCOs) em um painel com perfis mutacionais variados reforçaram esses achados. Notavelmente, PDCOs com mutações concomitantes em *KRAS* apresentaram sensibilidade reduzida à combinação, sugerindo o status de *KRAS* como potencial biomarcador de resistência.

Esses resultados fornecem uma sólida justificativa mecanicista e translacional para a combinação de inibidores de mTORC1/2 e BCL-xL em cânceres colorretais com mutação em *PIK3CA*. O estudo destaca o rastreamento de alta performance baseado em organoides como uma ferramenta poderosa para identificar terapias combinadas com aplicabilidade clínica, e aponta para inibidores seletivos de BCL-xL como potencialmente preferíveis ao navitoclax para evitar a toxicidade plaquetária mediada pelo alvo.