Restrição calórica reverte alterações de microRNA associadas à idade e ligadas ao risco de câncer de mama

O risco de câncer de mama aumenta de forma acentuada com a idade, e a restrição calórica (RC) é uma das formas mais reprodutíveis de retardar o envelhecimento e a formação de tumores em animais. Ainda assim, não está claro como a RC envia sinais protetores pelo corpo. Os microRNAs circulantes, pequenos RNAs reguladores encontrados no sangue, são estáveis, fáceis de coletar e associados ao envelhecimento, ao metabolismo e ao câncer, o que os torna candidatos atraentes. Este estudo investigou se a RC ao longo de toda a vida remodela o perfil de microRNAs no sangue de camundongos fêmeas geneticamente predispostas ao câncer de mama, antes do surgimento de qualquer tumor.

Os pesquisadores usaram 34 camundongos fêmeas MMTV-TGF-α sem tumores, alimentadas à vontade (AL, do inglês ad libitum) até a 10ª semana e depois designadas para AL, RC crônica (CCR; 15% menos calorias por dia) ou RC intermitente (ICR; restrição de 60% por uma semana, seguida de três semanas de alimentação livre). O sangue foi coletado após jejum noturno nas semanas 10 (jovens), 49–50 (adultas) e 81–82 (idosas), com as camundongos ICR amostradas ao final da restrição ou da realimentação. Microarrays traçaram o perfil dos microRNAs, e o limma identificou diferenças (p ajustado <0,1, |log2FC|>0,5). Os grupos eram pequenos: três ou quatro camundongos por grupo de dieta e oito camundongos AL jovens.

O envelhecimento remodelou o perfil de microRNAs circulantes nas camundongos AL (PERMANOVA p=0,009). Doze microRNAs, todos aumentados, diferiram entre adultas e jovens, e 47 estavam aumentados nas idosas em comparação às jovens. Os alvos validados apontaram para supressão da sinalização de IL-7, da beta-oxidação mitocondrial de ácidos graxos de cadeia longa e do ciclo do TCA, junto com enriquecimento da sinalização de GPCR e da neurogênese dopaminérgica. Foi feita uma verificação de hemólise com miR-451a versus miR-23a-3p, pois a coleta de sangue retro-orbital pode lisar as hemácias. Entre adultas e idosas, 10 microRNAs mudaram (2 aumentados, 8 reduzidos), com direções das vias invertidas.

A RC não alterou o perfil global na idade adulta (p=0,333) nem na velhice (p=0,123). Em vez disso, atuou sobre poucos microRNAs. Na idade adulta, a CCR alterou três (miR-494-3p, miR-140-5p, miR-30e-5p) e a ICR na fase de restrição alterou 15 (11 aumentados, 4 reduzidos). Na velhice, a CCR alterou apenas três microRNAs aumentados e a ICR não alterou nenhum. A comparação entre restrição e realimentação em camundongos ICR adultas mostrou quatro microRNAs aumentados, e nenhum nas idosas. Assim, os efeitos da dieta foram maiores na idade adulta, sugerindo uma janela dependente do tempo.

Três microRNAs mostraram reversão dos padrões do envelhecimento. O miR-30e-5p aumentou com a idade (+1,59 de variação log fold) e foi reduzido pela CCR (−1,77). O miR-142-5p aumentou (+0,58) e foi reduzido pela restrição na ICR (−0,63). O miR-494-3p estava elevado nas camundongos idosas (+3,10 vs jovens, +3,13 vs adultas) e foi reduzido no grupo ICR em realimentação (−2,89). Dos 181 microRNAs responsivos à idade e à dieta, 66 já haviam sido associados ao câncer de mama, mas apenas o miR-30e-5p também foi regulado pela RC.

Esses achados sugerem que os efeitos sistêmicos da RC podem passar por um pequeno conjunto de microRNAs reguladores, e não por uma reprogramação ampla, e que uma intervenção mais precoce pode funcionar melhor. O trabalho é correlacional: nenhum tumor foi estudado, os microRNAs não foram testados funcionalmente, os dados vêm apenas de camundongos, os grupos eram muito pequenos e o limiar de p ajustado era permissivo (<0,1). As vias-alvo vêm de inferência em bancos de dados. A tradução para mulheres continua não comprovada.