Les cellules LAM mutantes *TP53* instrumentalisent le TGF-β1 pour neutraliser l'immunothérapie

Les mutations de *TP53* surviennent dans 10 à 15 % des cas de LAM nouvellement diagnostiqués et jusqu'à 30 % des cas liés à une thérapie antérieure ou en rechute, plaçant les patients dans la catégorie à risque défavorable avec une survie globale médiane inférieure à sept mois. Même la greffe allogénique de cellules souches ne parvient pas à améliorer significativement les résultats, avec une survie globale à deux ans d'environ 9 à 19 % et des taux de rechute dépassant 60 %. Alors que les molécules bispécifiques de recrutement des cellules T (BiTE) et les thérapies CAR-T font leur entrée dans les essais cliniques de LAM, il devient urgent de comprendre comment le statut de *TP53* façonne le microenvironnement immunitaire.

Les auteurs ont utilisé trois lignées cellulaires de LAM (MV4-11, MOLM-13, OCI-AML3) modifiées par extinction de *TP53* médiée par shRNA, accompagnées de contrôles de type sauvage appariés, ainsi que des échantillons primaires de patients atteints de LAM stratifiés selon le statut de délétion de *TP53*. Des cellules T provenant de donneurs sains ou de patients atteints de LAM ont été co-cultivées avec ces cibles selon un ratio effecteur-cible de 1:6 en présence d'AMG 330, une molécule BiTE CD3×CD33, ou d'un recruteur de cellules T contrôle. La cytotoxicité, la prolifération et la production de cytokines ont été mesurées par cytométrie en flux sur trois à cinq jours. Des expériences avec insert Transwell ont physiquement séparé les cellules T des cellules de LAM afin d'isoler les effets du sécrétome. Les surnageants ont été analysés par protéomique quantitative, et les cellules T récupérées après co-culture ont fait l'objet d'un séquençage d'ARN en vrac.

Les cellules à extinction de *TP53* présentaient une résistance significativement plus élevée à la lyse médiée par AMG 330 par rapport à leurs homologues de type sauvage, dans les trois lignées cellulaires ainsi que dans les échantillons primaires de LAM avec délétion de *TP53*. La prolifération des cellules T et la sécrétion de cytokines pro-inflammatoires (notamment l'IFN-γ et le TNF-α) étaient nettement réduites dans les co-cultures avec des cellules déficientes en *TP53*. De manière cruciale, les expériences Transwell ont démontré que la séparation physique ne restaurait pas la fonction des cellules T, impliquant ainsi des facteurs solubles dans l'effet immunosuppresseur. Le profilage protéomique des milieux conditionnés a identifié le TGF-β1 comme significativement élevé dans les co-cultures à extinction de *TP53*. Le séquençage d'ARN des cellules T exposées à la LAM déficiente en *TP53* a révélé des signatures transcriptionnelles compatibles avec la sénescence cellulaire et l'arrêt du cycle cellulaire, caractérisées par une surexpression des inhibiteurs des kinases dépendantes des cyclines et des programmes géniques associés à la sénescence.

Ces résultats établissent un lien mécanistique entre la perte de fonction de *TP53*, l'hypersécrétion de TGF-β1 et l'épuisement/la sénescence des cellules T, qui ensemble atténuent l'efficacité des BiTE. Le sécrétome immunosuppresseur de la LAM déficiente en *TP53* représente ainsi à la fois une explication mécanistique de la résistance clinique et une cible thérapeutique. La combinaison d'inhibiteurs de la voie TGF-β avec des recruteurs de cellules T, ou le recours à des stratégies visant à prévenir la sénescence des cellules T, s'imposent comme des approches rationnelles pour ce sous-groupe de LAM à haut risque.

Les limites de l'étude incluent le recours à une extinction par shRNA plutôt qu'à de véritables modèles *TP53*-nuls construits par CRISPR, les effets potentiels hors cible des shRNA, ainsi que le nombre limité d'échantillons primaires de patients. Une validation in vivo et des études corrélatoires cliniques chez des patients atteints de LAM *TP53*-mutée traités par BiTE sont nécessaires pour confirmer la pertinence translationnelle.