Mastócitos Senescentes Impulsionam o Inflammaging com Tempestades de Citocinas Amplificadas

**Por que isso importa:** Os mastócitos (MCs) são sentinelas imunológicos inatos de longa vida, posicionados nas interfaces entre tecidos e o ambiente externo. Embora a senescência celular em linfócitos e macrófagos tenha sido amplamente estudada como um motor da inflamação crônica relacionada ao envelhecimento (inflammaging), os mastócitos têm sido amplamente ignorados nessa literatura. Este estudo preenche essa lacuna com a primeira caracterização abrangente de marcadores de senescência e suas consequências funcionais nos MCs.

**O que foi estudado:** Mastócitos derivados de medula óssea (BMMC) de camundongos jovens C57BL/6J foram cultivados por até 12+ semanas para induzir senescência replicativa, ou tratados com LPS bacteriano para induzir senescência por estresse. Ambos os modelos foram rigorosamente caracterizados quanto a marcadores canônicos de senescência: tamanho celular/granularidade por citometria de fluxo, expressão proteica de p16INK4A e p21CIP1/WAF1 por western blot, distribuição do ciclo celular com coloração Hoechst/Pyronin Y, atividade de SA-β-galactosidase (SA-β-Gal) e proliferação por diluição de CellTrace Violet. O perfil metabólico foi realizado em um analisador Seahorse XF96. Painéis de citocinas/quimiocinas do SASP e ativação de vias de sinalização (ERK, p38, NFκB, Src) foram avaliados. In vivo, camundongos deficientes em mastócitos c-Kit Wsh/Wsh envelhecidos, com e sem reconstituição com MCs, foram submetidos a desafio agudo com LPS intraperitoneal para medir respostas de citocinas dependentes de MCs.

**Principais resultados:** Após 12 semanas em cultura, os BMMCs apresentaram aumento significativo de tamanho celular, granularidade, expressão de p16 e p21, atividade de SA-β-Gal e parada do ciclo celular em G0/G1, com perda mínima de viabilidade. A análise metabólica revelou uma mudança em direção à glicólise e redução da respiração mitocondrial. O SASP dos MCs senescentes replicativos foi dominado por IL-23, IL-6, VEGF e CCL-2. Paradoxalmente, a desgranulação máxima e a secreção de citocinas após ativação por FcεRI (IgE/antígeno) ou TLR4 (LPS) foram reduzidas nos MCs senescentes, mesmo com o aumento da produção inflamatória basal. A senescência por estresse induzida por LPS produziu bursts intensos, porém transitórios, de citocinas, acompanhados de parada do ciclo celular e upregulation de β-Gal. In vivo, camundongos c-Kit Wsh/Wsh envelhecidos reconstituídos com MCs apresentaram respostas exacerbadas de citocinas peritoneais ao LPS agudo, e MCs purificados de animais tratados cronicamente com LPS mostraram produção basal elevada de citocinas, validando o fenótipo senescente célula-autônomo.

**Implicações:** Esses dados posicionam os MCs senescentes como uma população celular pró-inflamatória distinta, que contribui para a inflamação crônica de baixo grau característica dos tecidos que envelhecem. O SASP dos MCs senescentes — particularmente IL-23 e IL-6 — poderia amplificar os ciclos locais e sistêmicos de inflammaging e potencialmente agravar condições associadas ao envelhecimento, como doenças alérgicas, aterosclerose e fibrose.

**Ressalvas:** O estudo baseou-se no modelo BMMC, que mimetiza principalmente os MCs do tipo mucoso e pode não reproduzir completamente a biologia dos MCs do tecido conjuntivo in vivo. O modelo de reconstituição in vivo utiliza um background de deficiência genética de MCs (c-Kit Wsh/Wsh) que apresenta efeitos pleiotrópicos além da ausência de MCs. A validação em humanos ainda está por ser realizada.