Células Renais Senescentes Recrutam Agrupamentos Imunes que os Senolíticos Podem Desmantelar Parcialmente

Os rins declinam com a idade mesmo sem doença evidente, com perda de néfrons, fibrose e uma inflamação estéril de baixo grau chamada inflammaging. Acredita-se que as células senescentes, que estão em parada do ciclo celular, mas metabolicamente ativas, e secretam fatores inflamatórios conhecidos como SASP, impulsionem esse processo e prejudiquem o reparo após lesões. Não estava claro se a inflamação se espalha de forma difusa ou se concentra ao redor das células senescentes, nem como a terapia senolítica altera essa organização.

Os pesquisadores estudaram camundongos C57BL/6J: 10 machos jovens (3 a 4 meses) e 34 machos idosos (22 a 24 meses), além de duas fêmeas jovens apenas no conjunto de dados do NanoString. Eles combinaram coloração para SA-β-gal, hibridização in situ de RNA de p16 (Cdkn2a), imunocoloração para marcadores imunes, painéis de fibrose e inflamação do NanoString e transcriptômica espacial Visium. As análises se limitaram ao córtex renal. A senólise foi testada com o inibidor de BCL-2/BCL-xL ABT-737 em camundongos idosos (três doses com intervalos de 14 dias) e com ablação genética de células que expressam p16 em camundongos INK-ATTAC, com cinco camundongos por grupo.

Os rins envelhecidos apresentaram mais p16 do que os jovens, mas os camundongos idosos variaram muito. Quando os animais idosos foram divididos em grupos com p16 alto e p16 baixo, o p16 foi o correlato mais forte da expressão gênica. Ele esteve associado a 60 genes com regulação significativa (p ajustado <0,05), mais do que a infiltração de leucócitos, a coloração de lesão para Kim1 ou a fibrose pelo Picrosirius red. Os genes ligados a p16 alto foram enriquecidos em sinalização de citocinas, quimiotaxia, apresentação de antígenos e ativação de leucócitos, independentemente da idade cronológica.

As células imunes aumentaram com a idade de forma geral: leucócitos CD45, macrófagos F4/80, células T CD3, plasmócitos CD138 e células NK NKp46, além de pequenos números de subconjuntos de macrófagos CD86 e CD206. Dentro dos rins idosos, porém, apenas os macrófagos foram significativamente mais abundantes nas amostras com p16 alto do que nas com p16 baixo. Células T, plasmócitos e células NK não foram. Rins sem p16 mostraram menor abundância de leucócitos e macrófagos.

Espacialmente, tanto as células CD45 quanto as F4/80 foram significativamente enriquecidas em regiões positivas para SA-β-gal e a menos de 10 μm de túbulos positivos para p16, embora as células imunes ficassem ao lado dos túbulos senescentes, e não fossem senescentes em si. A análise Visium identificou uma vizinhança associada à senescência, restrita ao córtex, com programas tubulares inflamatórios, relacionados a macrófagos e de reparo falho. As duas abordagens senolíticas reduziram a carga senescente e o acúmulo de células imunes. Mesmo assim, os macrófagos permaneceram preferencialmente próximos às estruturas tubulares senescentes residuais.

Há ressalvas importantes. O trabalho foi feito em camundongos, em sua maioria machos, com grupos pequenos (frequentemente cinco por grupo), e os perfis do NanoString vêm de tecido total (bulk) e não permitem atribuir a expressão a tipos celulares específicos. A contagem de células dependeu em parte de métodos manuais de grade, e a divisão entre p16 alto e p16 baixo usou a média da coorte. As relações espaciais são apenas associativas. Se os senolíticos melhoram a função renal em humanos continua sem ser testado aqui.