Nanopartículas de Resveratrol Revestidas com Plaquetas Revertem o Envelhecimento Endotelial na Aterosclerose

A aterosclerose continua sendo a principal causa de morte cardiovascular, e sua progressão está intimamente ligada à senescência das células endoteliais vasculares (ECs) e à disfunção mitocondrial que a alimenta. O resveratrol (RSV), o polifenol encontrado em uvas vermelhas e vinho, possui propriedades antioxidantes, anti-inflamatórias e pró-angiogênicas bem documentadas, mas seu rápido metabolismo e baixa biodisponibilidade têm frustrado o uso clínico por décadas. Este estudo, publicado na Aging Cell, abordou esse obstáculo desenvolvendo um nanossistema de resveratrol revestido com membrana plaquetária (PM@RSV NPs), projetado para entregar RSV com precisão às lesões vasculares ateroscleróticas e investigar o mecanismo molecular responsável por seus efeitos vasculoprotetores.

As PM@RSV NPs foram fabricadas por evaporação de solvente combinada com tecnologia de revestimento de membrana, produzindo nanopartículas esféricas de aproximadamente 150–200 nm de diâmetro, com potencial zeta negativo confirmando a fusão bem-sucedida da membrana plaquetária. A eficiência de encapsulação verificada por HPLC superou 80%, e o revestimento plaquetário preservou proteínas de adesão essenciais — GPV, GPIX e P-selectina — que medeiam a ligação preferencial a células endoteliais aórticas de camundongos (MAECs) lesadas por ox-LDL e à vasculatura de lesões ateroscleróticas. Estudos de captação in vitro por microscopia confocal de varredura a laser demonstraram acúmulo significativamente maior de PM@RSV NPs em MAECs tratadas com ox-LDL em comparação com RSV-NPs não revestidas, validando a estratégia de direcionamento. Imagens de biodistribuição in vivo (IVIS) em camundongos ApoE−/− confirmaram enriquecimento seletivo nos sítios de lesão aórtica após injeção na veia caudal.

O núcleo mecanístico do estudo baseou-se no sequenciamento de RNA de ECs CD31+ separadas por citometria de fluxo de aortas inteiras de cinco grupos experimentais: controles selvagens, AS (camundongos ApoE−/− tratados com PBS), RSV-NPs, PM@RSV NPs e PM@RSV NPs + sh-FOXM1. A análise de enriquecimento de conjuntos de genes (GSEA) e a regressão LASSO convergiram para FOXM1 como o principal fator de transcrição diferencialmente superexpresso em camundongos AS tratados com PM@RSV NPs em comparação com os não tratados. Genes-alvo de FOXM1 envolvidos na reentrada no ciclo celular (CDK1, Ciclina B1) e na defesa antioxidante mitocondrial foram coordenadamente regulados para cima. O Western blot e a imuno-histoquímica confirmaram que as PM@RSV NPs elevaram robustamente a proteína FOXM1 tanto em MAECs quanto no tecido aórtico, efeito abolido pelo knockdown lentiviral com sh-FOXM1.

Funcionalmente, as PM@RSV NPs restauraram significativamente o potencial de membrana mitocondrial (MMP), medido pela fluorescência de JC-1, aumentaram o conteúdo celular de ATP em aproximadamente 2,3 vezes em relação ao grupo AS (p < 0,01) e reduziram as ROS intracelulares em cerca de 60% em comparação com os controles AS não tratados (p < 0,01). A coloração SA-β-Gal — um marcador canônico de senescência — mostrou redução de aproximadamente 55% nas ECs senescentes em células tratadas com PM@RSV NPs em comparação com o grupo AS. Os níveis proteicos de p21 e p16, efetores-chave da senescência, foram correspondentemente suprimidos, enquanto os marcadores de proliferação PCNA e Ki-67 aumentaram. In vivo, a coloração por Oil Red O das raízes aórticas em camundongos ApoE−/− revelou que as PM@RSV NPs reduziram a área de placa em aproximadamente 40% em comparação com os camundongos AS tratados com PBS; o knockdown com sh-FOXM1 reverteu substancialmente esse benefício, confirmando a dependência de FOXM1.

As avaliações de biossegurança não encontraram diferenças significativas nas enzimas hepáticas (ALT, AST), nos marcadores renais (BUN, creatinina) ou na aparência histológica do coração, fígado, baço, pulmão e rim entre os grupos de tratamento, apoiando um perfil de segurança favorável. As principais limitações do estudo incluem o uso exclusivo de camundongos ApoE−/− machos — uma ressalva importante, dadas as conhecidas diferenças entre os sexos na aterosclerose — e a ausência de dados farmacocinéticos em modelos animais maiores ou primatas não humanos. Ainda assim, este trabalho estabelece uma nanoplataforma mecanisticamente coerente e promissora do ponto de vista translacional, que conecta a entrega de RSV, a ativação de FOXM1, a rejuvenescência mitocondrial e a supressão da senescência endotelial em uma estratégia terapêutica unificada para o envelhecimento cardiovascular.