Podócitos derivados de células-tronco de pacientes reproduzem a cicatrização renal de origem genética e refletem a resposta do paciente aos esteroides

A glomeruloesclerose segmentar e focal (GESF, ou FSGS, na sigla em inglês) é uma lesão renal em que partes dos glomérulos, as unidades de filtração do rim, ficam cicatrizadas. Os podócitos, células especializadas que formam a barreira de filtração, perdem seus processos podais. Variantes genéticas são encontradas em até 60% das crianças com síndrome nefrótica resistente a esteroides e em cerca de 30% dos adultos com FSGS, e mais de 40 genes já foram implicados. Muitos desses genes afetam o citoesqueleto de actina dos podócitos. Mesmo pessoas com a mesma mutação podem apresentar características diferentes da doença, e modelos animais e celulares convencionais muitas vezes não reproduzem o contexto genético do paciente. Modelos específicos de cada paciente poderiam, portanto, ajudar a associar pacientes a tratamentos e evitar os ineficazes.

A equipe estudou uma paciente com menos de 30 anos, com uma mutação heterozigótica em *INF2* (c.217G>A; G73S). Mutações em *INF2* são uma causa comum de FSGS autossômica dominante, e ela teve uma resposta clínica parcial aos esteroides. Os pesquisadores coletaram fibroblastos dérmicos de uma biópsia de pele, reprogramaram-nos em células-tronco pluripotentes induzidas humanas (hiPSCs) por métodos epissômicos e as diferenciaram, passando por células progenitoras de néfrons, até podócitos (hiPSC-Podocytes). Células de uma doadora saudável do sexo feminino serviram de comparação. Os métodos descritos incluem teste de estabilidade cromossômica, sequenciamento de Sanger da mutação, qPCR, sequenciamento de RNA em massa (bulk) frente a conjuntos de genes marcadores de podócitos, imunocoloração, Western blotting, microscopia eletrônica de varredura e cultura 3D. O controle de qualidade abrangeu três clones de hiPSC da paciente, e o sequenciamento de RNA usou dois clones por estágio celular, além de podócitos condicionalmente imortalizados como referência.

Segundo o resumo, os hiPSC-Podocytes da paciente diferiram das células da doadora saudável em vários aspectos. Apresentaram protrusões mais curtas e níveis menores de marcadores associados à actina, e os níveis da proteína INF2 estavam alterados. Os filamentos de actina estavam desorganizados, com aumento da despolimerização da actina. Foram então testados dois tratamentos. O agente modulador de actina Bis-T-23 melhorou o citoesqueleto de actina nas células da paciente, assim como o esteroide Solu-Decortin H (SDH). O efeito do esteroide é coerente com a resposta clínica parcial da paciente aos esteroides.

Os autores defendem que os hiPSC-Podocytes podem reproduzir, em laboratório, características da doença e respostas a medicamentos específicas de cada paciente. Essa plataforma poderia apoiar escolhas de tratamento personalizadas na FSGS genética, incluindo testar se determinado paciente tem probabilidade de se beneficiar de esteroides ou de fármacos que atuam na actina. O modelo também busca esclarecer a variabilidade da FSGS genética de início na idade adulta, mesmo com mutações idênticas.

As evidências vêm de uma paciente e de uma doadora saudável, de modo que os achados são uma prova de conceito. O texto disponível para este resumo incluía a introdução e parte da metodologia; os resultados quantitativos e a discussão não estavam disponíveis. Ainda é preciso demonstrar se as respostas a medicamentos in vitro preveem de forma confiável os desfechos clínicos e se os achados se estendem a outras variantes de *INF2* ou a outros genes da FSGS.