O Relógio Interno do Fígado Controla os Sinais de Queima de Gordura no Tecido Adiposo

O fígado é a principal fábrica de proteínas do organismo, liberando hormônios, proteínas carreadoras e fatores imunológicos na corrente sanguínea. Muitas dessas proteínas secretadas flutuam ao longo do ciclo de 24 horas, mas o escopo completo da secreção hepática regulada pelo ritmo circadiano e suas consequências funcionais para tecidos distantes permanecia pouco compreendido.

Para preencher essa lacuna, a equipe de pesquisa desenvolveu um ensaio ex vivo validado: tecido hepático de camundongo recém-isolado (~100 mg) foi incubado por 45 minutos em meio quimicamente definido, continuamente oxigenado com carbogênio. O meio condicionado resultante foi concentrado e analisado por proteômica DIA LC-MS/MS. A viabilidade do tecido foi confirmada por níveis estáveis de ATP, ausência de estabilização de HIF-1α e morte celular mínima à histologia. A Brefeldina A reduziu a secreção em ~50%, confirmando a secreção ativa dependente do eixo RE-Golgi. As amostras foram coletadas em duas fases circadianas e de camundongos com nocaute de Bmal1 específico do fígado (LiKO).

O conjunto de dados proteômicos abrangeu mais de 3.000 proteínas na fração secretada, classificadas pela ferramenta OutCyte. Centenas de proteínas apresentaram secreção dependente do horário do dia ou do relógio biológico, abrangendo vias de matriz extracelular, imunológica, redox, xenobiótica e de ácidos graxos. Diferenças dependentes do sexo também foram detectadas. Um achado notável foi que a endostatina — um produto de clivagem anti-angiogênico de ~20 kDa da COL18A1 — foi secretada em níveis mais elevados durante a fase inativa e de jejum (fase clara). Esse padrão temporal foi perdido nos camundongos LiKO, indicando controle direto pelo relógio circadiano. Mecanisticamente, a perda de Bmal1 combinou repressão transcricional de Col18a1 com processamento proteolítico desregulado para alterar a produção de endostatina.

A validação funcional demonstrou que a administração de endostatina recombinante em camundongos durante a fase de jejum suprimiu a expressão de genes mitocondriais no tecido adiposo branco (TAB). Em adipócitos 3T3-L1, o tratamento com endostatina reduziu a taxa de consumo de oxigênio — uma medida da respiração mitocondrial — enquanto simultaneamente aumentou a lipólise e a liberação de glicerol. Esses efeitos foram dependentes do tempo, consistentes com o controle circadiano observado in vivo.

Em conjunto, os achados estabelecem um eixo endócrino fígado-tecido adiposo no qual o relógio circadiano hepático restringe a secreção de endostatina à fase de jejum, onde ela atenua a atividade mitocondrial dos adipócitos e promove a mobilização de gordura — adaptações metabólicas apropriadas para um estado de jejum. O trabalho amplia a compreensão de como a secreção temporal de proteínas coordena a fisiologia interórgãos e identifica a endostatina como uma hepatocina circadiana com relevância metabólica.