Inibidores de JAK e curcumina reduzem a senescência induzida por radiação UV em células de um paciente com xeroderma pigmentoso

O xeroderma pigmentoso (XP) é um distúrbio hereditário em que o reparo defeituoso por excisão de nucleotídeos deixa a pele incapaz de corrigir os danos causados pela radiação ultravioleta. Os pacientes enfrentam fotoenvelhecimento acelerado, risco de melanoma cerca de 2.000 vezes maior, risco de câncer de pele não melanoma 10.000 vezes maior, e de 20% a 55% desenvolvem declínio neurológico. A incidência no Japão é de 10 a 25 por milhão, cerca de dez vezes a das populações ocidentais, em grande parte por causa de uma mutação fundadora em *XPA*. O cuidado se limita à proteção contra o sol e à excisão de cânceres; por isso, os autores perguntaram se a senescência celular impulsiona o envelhecimento prematuro da pele e se poderia ser um alvo terapêutico.

A equipe diferenciou células-tronco pluripotentes induzidas de um paciente com XP-A e de um indivíduo saudável em melanócitos (XP-iMCs e HC-iMCs), confirmando a identidade pela expressão de MITF e SOX10. A exposição a UV (150 J/m²) ou a 1 µM de cisplatina, que causa ligações cruzadas reparadas pela mesma via das lesões por UV, produziu marcação de dano ao DNA por γH2AX mais intensa nos XP-iMCs do que nas células saudáveis. Ambos os estressores aumentaram significativamente os XP-iMCs positivos para SA-β-gal e elevaram a expressão de certos genes do SASP. A cisplatina gerou uma fração senescente maior e uma dosagem mais uniforme, por isso foi usada na triagem.

Para os senolíticos, a senescência foi induzida com cisplatina por 6 dias, seguida de 3 dias de exposição a 12 compostos candidatos. Os melanócitos saudáveis foram afetados de forma desprezível, mas os XP-iMCs tratados com cisplatina foram mais sensíveis a inibidores da família BCL-2 (ABT-263, A-1331852, A-1155463, S63845) e a inibidores de HSP90 (17-DMAG, ganetespib). No entanto, os melanócitos eram mais vulneráveis do que os queratinócitos mesmo sem indução de senescência, o que levanta preocupações quanto à otimização da dose, e o ABT-263 tem toxicidade plaquetária conhecida. Isso levou os autores a se voltarem para agentes senomórficos.

Quinze senomórficos foram administrados simultaneamente com a cisplatina por 6 dias e avaliados por coloração SPiDER-βGal e citometria de fluxo (três réplicas biológicas, ANOVA de uma via com teste de Tukey). Quatro reduziram significativamente a fração senescente: os inibidores de JAK baricitinibe e upadacitinibe, e os curcuminoides curcumina e EF24. O sequenciamento de RNA mostrou que a cisplatina ativou as vias de interação citocina-receptor de citocina, JAK/STAT e PI3K/AKT, e que o tratamento as fez diminuir novamente, embora as respostas dos genes do SASP tenham diferido entre as classes de fármacos. O meio condicionado de XP-iMCs senescentes induziu SA-β-gal em células novas, indicando senescência parácrina.

Como a cisplatina é apenas um substituto, os experimentos foram repetidos com UV em baixa dose (40 J/m²). O UV e a cisplatina ativaram genes de senescência em comum. O tratamento senomórfico reduziu significativamente as células positivas para SA-β-gal nos dias 3 e 6, e o RNA-seq mostrou regulação negativa da sinalização de citocinas, JAK/STAT e PI3K/AKT, além de vários genes do SASP induzidos por UV.

As evidências são preliminares. Baseiam-se em uma única linhagem derivada de um paciente com XP-A comparada a um único controle saudável, in vitro, com réplicas em triplicata e sem dados em animais ou humanos. Os fármacos foram administrados junto com o dano, testando a prevenção, e não a eliminação de senescência já estabelecida. Os inibidores de JAK acarretam riscos de imunossupressão sistêmica, o que é relevante em uma população propensa a câncer; assim, a segurança e a via de administração continuam sendo questões em aberto.