A Terapia CAR-T In Vivo Avança do Laboratório para a Clínica como um Agente Anticâncer Pronto para Uso

**Por que isso importa:** As terapias CAR-T aprovadas transformaram os desfechos em cânceres hematológicos recidivantes/refratários, mas todos os 14 produtos atualmente aprovados exigem fabricação ex vivo individualizada com várias semanas de duração, custando centenas de milhares de dólares. A terapia CAR-T in vivo promete condensar esse processo em uma única injeção preparada em um a três dias, ampliando dramaticamente o acesso dos pacientes.

**O que foi estudado:** Esta abrangente revisão de 2025 de Xu et al. (Journal of Hematology & Oncology) examina todo o pipeline pré-clínico e clínico emergente das terapias com células CAR in vivo. Os autores avaliam sistematicamente vetores virais — vetores lentivirais (LVs) e vírus adeno-associados (AAVs) — juntamente com plataformas não virais, incluindo nanopartículas lipídicas (LNPs), nanopartículas poliméricas (NPs), veículos de entrega bioinspirados (exossomos, nanopartículas revestidas com membrana celular) e dispositivos de macroencapsulação. Para cada plataforma, os autores analisam estratégias de direcionamento, formatos de carga genética, perfis de integração, imunogenicidade, escalabilidade de produção e status de tradução clínica.

**Principais descobertas:** Os LVs continuam sendo a plataforma de integração mais eficiente; a pseudotipagem com glicoproteínas do vírus Nipah (NiV) ou do vírus do Sarampo (MV) — em vez do VSV-G de amplo tropismo — permite a transdução específica de células T por meio de ligantes direcionados a CD3, CD4 ou CD8 (scFvs, VHHs ou DARPins). Os MV-LVs direcionados a CD4 alcançaram até 60% de transdução de linfócitos CD4+ in vivo, e modelos animais sugerem que os construtos direcionados a CD4 podem superar os direcionados a CD8 devido ao menor esgotamento das células T CD4+. Os AAVs oferecem integração sítio-específica precisa quando combinados com CRISPR-HDR, alcançando >90% de especificidade no direcionamento de células T CD8+ em estudos murinos, embora seu limite de carga de 4,7 kb restrinja construtos CAR de comprimento completo. As LNPs e NPs poliméricas proporcionam expressão transitória não integrativa com baixa imunogenicidade e capacidade de dosagem repetida; LNPs ionizáveis funcionalizadas com anticorpos direcionados a células T geraram células CAR-T funcionais in vivo capazes de eliminar linfoma de células B em modelos murinos. Veículos bioinspirados, como exossomos e partículas semelhantes a vírus, oferecem imunogenicidade ultrabaixa e podem atravessar barreiras biológicas. Os dispositivos de macroencapsulação permitem a entrega gênica localizada e sustentada diretamente no sítio tumoral. A revisão observa que os primeiros ensaios em humanos para plataformas CAR-T in vivo tanto virais quanto não virais foram relatados em 2025, representando uma transição marcante para a avaliação clínica.

**Implicações:** A convergência de maior especificidade de direcionamento, cargas não integrativas mais seguras (mRNA, RNA circular) e fabricação escalável posiciona a terapia CAR-T in vivo como uma potencial sucessora das abordagens ex vivo — não apenas para neoplasias hematológicas, mas também para tumores sólidos e doenças autoimunes.

**Ressalvas:** A maior parte das evidências permanece pré-clínica, predominantemente oriunda de modelos murinos que podem não reproduzir plenamente a complexidade imunológica humana. Transdução fora do alvo, risco de mutagênese insercional com vetores integrativos, imunogenicidade a capsídeos virais e obstáculos regulatórios para novas plataformas de entrega são desafios não resolvidos que exigem validação clínica rigorosa.