Composto Herbal Wogonin Combate a Pancreatite Alcoólica Potencializando a Limpeza Celular

A pancreatite alcoólica (AP) surge quando a exposição crônica ao álcool perturba os sistemas de manutenção celular do pâncreas, levando ao acúmulo perigoso de grânulos de zimogênio (ZGs) e à ativação prematura de enzimas digestivas. Uma deficiência molecular central subjacente à AP é a atividade prejudicada do Fator de Transcrição EB (TFEB), o controlador mestre da autofagia e da biogênese lisossomal. Sem autofagia suficientemente mediada pelo TFEB, ZGs danificados se acumulam e desencadeiam cascatas inflamatórias. Apesar desse alvo mecanístico claro, nenhum ativador farmacológico do TFEB foi desenvolvido clinicamente.

Este estudo investigou se a Wogonina — um flavonoide bioativo presente na <em>Scutellaria baicalensis</em> (Huangqin/HQ), uma erva há muito utilizada na medicina tradicional chinesa para o tratamento de pancreatite — poderia atuar como um ativador do TFEB. Utilizando células repórteres TFEB-AcGFP e sistemas de fluxo autofágico por fluorescência em tandem mRFP-GFP-LC3 em células HeLa, os pesquisadores demonstraram que extratos de HQ e Wogonina purificada promoveram de forma robusta a translocação nuclear do TFEB, aumentaram a expressão de TFEB e LAMP1, e melhoraram significativamente o fluxo autofágico — convertendo autofagossomos em autolisossomos degradativos em taxas elevadas.

<em>In vivo</em>, camundongos C57BL/6J submetidos a um modelo de alimentação alcoólica crônica com episódio de consumo excessivo (modelo Gao-binge) apresentaram redução das atividades séricas de amilase e lipase, menor acúmulo de ZGs, redução da vacuolização acinar e menor edema pancreático quando tratados com HQ (350 mg/kg). Análises moleculares confirmaram a restauração do TFEB, PGC1α, LAMP1, da renovação de LC3B-II e da degradação de p62 no tecido pancreático. De forma decisiva, camundongos com nocaute específico do TFEB em células acinares não se beneficiaram do tratamento com HQ, e a superexpressão de TFEB por adenovírus recapitulou os efeitos protetores da HQ mesmo sem o tratamento farmacológico — estabelecendo o TFEB como o mediador essencial.

Do ponto de vista mecanístico, a triagem virtual baseada em estrutura e o encaixe molecular identificaram o AMPK como o principal parceiro de ligação da Wogonina entre os reguladores de quinases upstream do TFEB. Isso foi validado por meio de três ensaios biofísicos ortogonais: ressonância plasmônica de superfície (SPR), calorimetria de titulação isotérmica (ITC) e ensaio de deslocamento térmico celular (CETSA). Constatou-se que a Wogonina adota uma pose de ligação adenina-mimética no sítio ativo do AMPK, estabilizando a proteína quinase — em vez de simplesmente ativá-la cataliticamente — e, dessa forma, sustentando a supressão mediada pelo AMPK do mTORC1 e a fosforilação direta do TFEB, ambas as quais promovem a atividade nuclear do TFEB.

Esses achados estabelecem a Wogonina como o principal agente bioativo responsável pela eficácia anti-pancreatite da Huangqin e, de forma mais ampla, como uma prova de conceito para compostos vegetais estabilizadores de quinases que visam ao eixo AMPK-TFEB-autofagia. Para o campo da longevidade e do envelhecimento saudável, essa via AMPK-TFEB é de significativo interesse, uma vez que tanto a ativação do AMPK quanto a autofagia aprimorada estão associadas à resiliência celular ao estresse e à longevidade do organismo. O estudo abre uma estratégia botânica promissora para o desenvolvimento de agonistas do TFEB no tratamento da pancreatite e, potencialmente, de outras doenças relacionadas à deficiência de autofagia.