Híbridos engenheirados de anticorpo e lectina liberam as células imunes contra o câncer ao bloquear checkpoints baseados em açúcares

O bloqueio de checkpoints transformou a oncologia, mas menos de 20% dos pacientes tratados respondem, e um quarto dos que respondem desenvolve resistência. As células cancerígenas costumam exibir glicanos alterados, ricos em ácido siálico, que se ligam a receptores Siglec inibitórios em células imunes, formando "checkpoints glico-imunes". Esses checkpoints têm sido difíceis de atingir com fármacos: anticorpos anti-glicano de alta qualidade são escassos, os ligantes de lectinas costumam ser múltiplos e mal definidos, e os chamados "decoys" de lectina fusionados a Fc se ligam de forma fraca demais (µM–mM) para funcionar como terapias.

Os autores projetaram quimeras anticorpo-lectina (AbLecs). Usando engenharia de Fc do tipo "knobs-into-holes", eles coexpressaram as cadeias pesada e leve do trastuzumab com Siglec-7-Fc ou Siglec-9-Fc, produzindo moléculas heterotriméricas (T7 e T9) em uma única cultura. O braço de anticorpo, de alta afinidade, ancora a molécula ao HER2 na superfície da célula, criando uma alta concentração local que permite ao braço Siglec, de baixa afinidade, se ligar a sialoglicanos da mesma célula. Os autores confirmaram a montagem por SDS-PAGE, western blot e espectrometria de massas, e encontraram temperaturas de fusão de 55–60 °C.

As AbLecs se ligaram a células HER2+ com afinidade aparente na faixa de nanomolar baixo, semelhante à do trastuzumab, enquanto os decoys Siglec-Fc isolados praticamente não se ligaram. As AbLecs com mutação de arginina tiveram ligação cerca de 2 a 3 vezes mais fraca, mostrando que a interação com glicanos contribui. As AbLecs bloquearam seletivamente a ligação do decoy Siglec correspondente, quase até os níveis observados com tratamento com sialidase. A T7 também competiu com um anticorpo pelo epítopo de Siglec-7 no CD43. Um modelo computacional guiado por estrutura estimou que a T7 entrega domínios de ligação de Siglec-7 cerca de 400 vezes mais eficazmente que o Siglec-7-Fc, e converte a ligação do Siglec-7-Fc de bivalente para majoritariamente monovalente, o que pode romper o agrupamento (clustering) de Siglecs e a sinalização inibitória.

Do ponto de vista funcional, as AbLecs aumentaram a fagocitose por macrófagos humanos primários e a citotoxicidade por células NK e granulócitos, além do efeito do trastuzumab, em vários doadores e linhagens celulares. A atividade dependeu do HER2 e dos receptores Fcγ, e o aumento desapareceu quando o Siglec-alvo foi bloqueado ou quando os ligantes de Siglec foram removidos com sialidase, o que sustenta um mecanismo duplo: função efetora do anticorpo mais bloqueio do checkpoint glico-imune. Em um modelo murino humanizado e imunocompetente (Siglec-7/9 e FcγR humanos, com os ortólogos murinos nocauteados) com metástases pulmonares de B16D5-HER2, as AbLecs reduziram a carga tumoral. Os autores relatam que a plataforma pode ser estendida a outros antígenos (HER2, CD20, EGFR) e a desenhos de bloqueio duplo que combinam PD-1/PD-L1, CD47/SIRPα ou o direcionamento à galectina-9, com sinergia em relação aos checkpoints já estabelecidos.

Ressalvas: o trabalho é pré-clínico, o texto fornecido está truncado antes dos dados completos in vivo, de combinação e de bloqueio duplo, e a segurança clínica, a farmacocinética e a imunogenicidade permanecem não testadas.