O Receptor CXCR2 Bloqueia a Sensibilização à Radiação no Câncer de Cabeça e Pescoço de Difícil Tratamento

O HNSCC HPV-negativo localmente avançado é tratado com doses cumulativas de radiação de 60–80 Gy, contudo a recidiva local ocorre em grande proporção dos pacientes dentro de três anos. Um fator biológico central dessa resistência é a senescência induzida pela terapia: a irradiação cria danos persistentes ao DNA que mantêm as células em um estado de parada do crescimento, porém metabolicamente ativo, estimulando a secreção de uma mistura complexa de citocinas, quimiocinas e fatores de crescimento (o SASP) que pode reforçar a sobrevivência e a regeneração tumoral. Trabalhos anteriores deste grupo demonstraram que os níveis de senescência e de SASP se correlacionam com a radiorresistência no HNSCC e que o eixo quimiocínico CXCR2 mediado por NF-κB possui significado prognóstico.

Para explorar a dependência das células senescentes nas proteínas antiapoptóticas da família Bcl-2, os investigadores combinaram o BH3-mimético ABT-263 (navitoclax) com irradiação por fótons nas linhagens celulares HPV-negativas Cal33 e UPCI:SCC040 — ambas conhecidamente altamente radiorresistentes e propensas à senescência. A citotoxicidade do fármaco foi inicialmente titulada (1 µM para Cal33, 5 µM para UPCI:SCC040), e os tratamentos combinados foram avaliados por meio de viabilidade (alamarBlue), apoptose (citometria de fluxo com Annexin V/PI), senescência (SA-β-gal/C12FDG), sobrevivência clonogênica (ajuste linear-quadrático), proteínas do SASP secretadas (ELISA para IL-1α, IL-1β, IL-8, CXCL1), expressão de receptores (qRT-PCR e Western blot) e focos residuais de quebras de dupla fita no DNA (colocalização de γH2AX/53BP1 às 24 h).

Nas células Cal33, o ABT-263 combinado com a radiação aumentou a apoptose (por meio da ativação de Bax e da inibição de Bcl-xL), reduziu a senescência induzida pela irradiação e diminuiu significativamente a sobrevivência clonogênica de forma sinérgica. Nas células UPCI:SCC040, a combinação também reduziu a viabilidade, mas a sobrevivência clonogênica não foi significativamente alterada. A diferença mecanística foi atribuída ao CXCR2: as células Cal33 apresentaram forte regulação negativa do CXCR2 após o tratamento com ABT-263 associado à radiação, ao passo que as células UPCI:SCC040 paradoxalmente regularam positivamente o CXCR2. Quando o CXCR2 foi silenciado de forma transiente por siRNA nas células UPCI:SCC040 antes do tratamento combinado, a radiossensibilização foi restaurada. Notavelmente, os focos de colocalização de γH2AX/53BP1 às 24 h após a irradiação não foram significativamente elevados por nenhuma combinação, indicando que o efeito de sensibilização opera por meio de vias de sinalização de sobrevivência, e não pelo aumento do dano ao DNA ou pelo comprometimento do reparo do DNA.

Esses achados propõem um modelo no qual o ABT-263 elimina células senescentes produtoras do SASP e amplifica a apoptose, mas seu benefício de radiossensibilização pode ser neutralizado pela sinalização pró-sobrevivência mediada pelo CXCR2. O CXCR2 e seus ligantes (incluindo IL-8/CXCL8 e CXCL1) são alvos estabelecidos do NF-κB, cuja atividade parácrina e autócrina sustenta a sobrevivência e a proliferação celular. As células UPCI:SCC040 parecem desenvolver uma regulação positiva compensatória do CXCR2 que contorna a pressão apoptótica imposta pelo ABT-263, preservando assim a capacidade clonogênica apesar da redução geral da viabilidade.

Do ponto de vista clínico, esses resultados sugerem que o perfil de expressão do CXCR2 poderia servir como biomarcador preditivo da eficácia da radiossensibilização pelo ABT-263 no HNSCC HPV-negativo. Pacientes cujos tumores não reduzem a expressão do CXCR2 em resposta ao tratamento podem necessitar da coadministração de um antagonista do CXCR2 para alcançar uma radiossensibilização clinicamente significativa. O estudo também reforça o conceito mais amplo de que direcionar a senescência — seja pela eliminação de células senescentes (senolíticos) ou pela supressão do SASP (senomórficos) — representa uma estratégia terapêutica racional para melhorar o controle tumoral duradouro nesse subgrupo de cânceres de difícil tratamento.