RNA Circular de Telomerase Supera mRNA na Reversão do Envelhecimento Acelerado em Células de Progéria

**Por Que Isso É Importante** O envelhecimento cardiovascular é o principal impulsionador de infartos e derrames, e a Síndrome de Progeria de Hutchinson-Gilford (HGPS) comprime décadas de envelhecimento vascular para a infância. Compreender como reverter a senescência endotelial nesse modelo extremo tem implicações diretas para o envelhecimento normal. Estudos anteriores mostraram que a transfecção transiente com mRNA linear codificando a transcriptase reversa da telomerase (TERT) poderia resgatar parcialmente as células endoteliais de HGPS, mas o mRNA tem vida curta, limitando sua durabilidade. O RNA circular, por não ter as extremidades livres atacadas pelas exonucleases, teoricamente dura mais e produz proteínas ao longo de uma janela prolongada.

**O Que Foi Estudado** A equipe gerou células endoteliais (ECs) a partir de iPSCs derivadas de pacientes com HGPS e as comparou a ECs controle de pais geneticamente normais. Eles transfectaram as HGPS-ECs uma única vez com quantidades equimolares de mRNA de TERT do tipo selvagem, mRNA de TERT cataliticamente inativo (CI) ou circRNA de TERT (1 µg/3–4×10⁵ células), acompanhando os desfechos de 3 a 28 dias após a transfecção. Os endpoints abrangeram morfologia, angiogênese, captação de LDL, produção de óxido nítrico, comprimento dos telômeros (q-FISH), coloração com SA-β-galactosidase, morfologia nuclear, expressão gênica de marcadores de senescência/inflamação, dano ao DNA (γH2AX) e saúde mitocondrial (ROS, potencial de membrana).

**Principais Descobertas** Em todos os endpoints, o circRNA de TERT foi superior ao mRNA linear de TERT. Morfologicamente, as HGPS-ECs tratadas com circRNA eram mais alongadas e menores em área, assemelhando-se a controles saudáveis. As células positivas para SA-β-galactosidase foram reduzidas ~3 vezes pelo circRNA em comparação a uma redução menor pelo mRNA e, aos 28 dias após a transfecção, as células tratadas com circRNA mantiveram baixos níveis de β-gal, enquanto as tratadas com mRNA haviam revertido para níveis próximos aos de HGPS não tratada. O alongamento dos telômeros, confirmado por q-FISH, também foi maior e mais duradouro com o circRNA. Os genes de senescência p16 e p21, a proteína específica da doença progerin, e as citocinas inflamatórias IL-1β, IL-6, IL-8 e MCP-1 foram todos mais substancialmente reduzidos pelo circRNA. A geração de óxido nítrico, a captação de LDL acetilado e a formação de redes em Matrigel (segmentos, segmentos principais, comprimento de tubos) foram restauradas a níveis próximos ao normal. O ROS mitocondrial foi reduzido e o potencial de membrana normalizado de forma mais eficaz pelo circRNA. O TERT cataliticamente inativo não trouxe benefícios, confirmando que a atividade enzimática da telomerase — e não a mera presença do RNA — é o que impulsiona esses efeitos.

**Implicações** Este estudo posiciona o circRNA de TERT como uma terapia de RNA potencialmente transformadora para o envelhecimento vascular. Uma dose única que oferece semanas de benefício representa uma melhora enorme em relação a um regime que exige injeções repetidas de mRNA. Além da HGPS, a abordagem poderia teoricamente ser aplicada à disfunção endotelial relacionada ao envelhecimento normal e às doenças cardiovasculares. Esta é também a primeira aplicação cardiovascular e anti-senescência de RNA circular terapêutico já relatada.

**Ressalvas** Todos os experimentos foram conduzidos in vitro utilizando células derivadas de iPSCs. Se o circRNA sobrevive à administração in vivo e alcança concentrações teciduais suficientes sem provocar ativação imunológica ainda precisa ser estabelecido. A janela de 28 dias, embora encorajadora, não determina se uma dose única seria terapeuticamente suficiente ou com que frequência seria necessária a reaplicação.