Canagliflozina Bloqueia o Transporte Renal de Sódio via ENaC e SGK1 Independentemente do SGLT2

Os inibidores de SGLT2 (gliflozinas) são hoje amplamente utilizados não apenas para diabetes, mas também para insuficiência cardíaca e doença renal crônica, embora os mecanismos por trás de seus benefícios cardiorrenal permaneçam incompletamente compreendidos. A canagliflozina, em particular, apresenta diferenças clínicas em relação a outras gliflozinas — reduções mais pronunciadas de HbA1c e peso corporal, maior risco de eventos adversos relacionados à depleção de volume e preocupações iniciais com hipercalemia —, sugerindo mecanismos off-target específicos do fármaco. Este estudo investigou se a canagliflozina afeta o transporte de sódio no néfron distal, uma região crítica para a regulação da pressão arterial e o equilíbrio do potássio.

Os pesquisadores utilizaram células mCCDcl1, uma linhagem celular validada de células principais do ducto coletor cortical de camundongo, para mensurar a corrente de curto-circuito sensível à amilorida (ISC) como leitura do transporte eletrogênico de sódio dependente de ENaC. A canagliflozina reduziu significativamente a ISC, enquanto a empagliflozina não produziu efeito. Experimentos de permeabilização seletiva de membrana dissecaram as contribuições da condutância apical do ENaC e da atividade da Na⁺/K⁺ ATPase basolateral, revelando que a canagliflozina inibiu ambas. Esses achados foram confirmados em tecido nativo do cólon distal de camundongo, que expressa ENaC mas não possui SGLT2, descartando qualquer mecanismo dependente de SGLT2.

Um insight mecanístico fundamental emergiu da observação de que a canagliflozina — mas não a empagliflozina — reduziu agudamente a abundância proteica de SGK1 tanto em células de túbulo proximal renal de gambá (opossum kidney) quanto em células mCCDcl1. SGK1 é uma serina/treonina quinase que promove a expressão de superfície e a atividade do ENaC por meio da fosforilação de Nedd4-2, impedindo a ubiquitinação e a internalização do ENaC. O inibidor seletivo de SGK1 GSK650394 fenorecopiou os efeitos da canagliflozina sobre a ISC, corroborando a supressão de SGK1 como elo mecanístico. Ensaios de biotinilação de superfície confirmaram redução na localização apical de membrana das subunidades α e γ do ENaC com o tratamento por canagliflozina, compatível com aumento da internalização do canal, enquanto a abundância de membrana da Na⁺/K⁺ ATPase permaneceu inalterada — sugerindo que a inibição da ATPase pode ser secundária à redução da entrada de sódio.

O estudo também avaliou se a inibição do Complexo I mitocondrial — outro efeito off-target conhecido da canagliflozina — poderia explicar esses resultados. A canagliflozina reduziu a ISC tanto na presença quanto na ausência de rotenona (um inibidor do Complexo I), indicando que os efeitos sobre o transporte de sódio são independentes da atividade do complexo I mitocondrial. Isso posiciona a supressão de SGK1 como o mecanismo proximal mais provável.

Esses achados identificam o ENaC e a Na⁺/K⁺ ATPase como novos sítios de inibição off-target da canagliflozina no néfron distal, mediados a montante por SGK1. Esse mecanismo pode explicar, em parte, o perfil clínico diferenciado da canagliflozina, incluindo seus efeitos mais pronunciados de redução da pressão arterial e os relatos iniciais de distúrbios eletrolíticos.