Las células de LMA con mutación en *TP53* utilizan TGF-β1 como arma para neutralizar la inmunoterapia

Las mutaciones en TP53 ocurren en el 10–15% de los casos de LMA recién diagnosticados y hasta en el 30% de los casos relacionados con terapia previa o en recaída, lo que sitúa a estos pacientes en la categoría de riesgo adverso con una mediana de supervivencia global inferior a siete meses. Incluso el trasplante alogénico de células madre no logra mejorar los desenlaces de forma significativa, con una supervivencia global a dos años de aproximadamente el 9–19% y tasas de recaída superiores al 60%. A medida que las moléculas biespecíficas de reclutamiento de células T (BiTE) y las terapias con CAR-T entran en ensayos clínicos para la LMA, resulta urgente comprender cómo el estado de TP53 modula el microambiente inmunitario.

Los autores utilizaron tres líneas celulares de LMA (MV4-11, MOLM-13, OCI-AML3) modificadas mediante knockdown de TP53 mediado por shRNA, junto con sus controles de tipo salvaje correspondientes, además de muestras primarias de pacientes con LMA estratificadas según el estado de deleción de TP53. Se cocultivaron células T de donantes sanos o de pacientes con LMA junto con estas dianas en una proporción efector-diana de 1:6, empleando AMG 330, una molécula BiTE CD3×CD33, o un reclutador de células T control. La citotoxicidad, la proliferación y la producción de citocinas se midieron mediante citometría de flujo a lo largo de tres a cinco días. Experimentos con insertos Transwell separaron físicamente las células T de las células de LMA para aislar los efectos del secretoma. Los sobrenadantes se analizaron mediante proteómica cuantitativa, y las células T recuperadas de los cocultivos se sometieron a secuenciación masiva de RNA.

Las células con knockdown de TP53 mostraron una resistencia significativamente mayor a la actividad citotóxica mediada por AMG 330 en comparación con sus contrapartes de tipo salvaje en las tres líneas celulares y en muestras primarias de LMA con deleción de TP53. La proliferación de células T y la secreción de citocinas proinflamatorias (entre ellas IFN-γ y TNF-α) se redujeron notablemente en los cocultivos con células deficientes en TP53. De manera destacada, los ensayos con Transwell demostraron que la separación física no restauró la función de las células T, lo que implica a factores solubles en el efecto inmunosupresor. El perfilado proteómico de los medios condicionados identificó TGF-β1 como significativamente elevado en los cocultivos con knockdown de TP53. La secuenciación de RNA de células T expuestas a LMA deficiente en TP53 reveló firmas transcripcionales compatibles con senescencia celular y arresto del ciclo celular, caracterizadas por la sobreexpresión de inhibidores de quinasas dependientes de ciclina y programas génicos asociados a la senescencia.

Estos hallazgos establecen un vínculo mecanístico entre la pérdida de función de TP53, la hipersecreción de TGF-β1 y el agotamiento/senescencia de las células T, que en conjunto reducen la eficacia de las BiTE. El secretoma inmunosupresor de la LMA deficiente en TP53 representa, por tanto, tanto una explicación mecanística de la resistencia clínica como una diana terapéutica. La combinación de inhibidores de la vía TGF-β con reclutadores de células T, o el uso de estrategias para prevenir la senescencia de las células T, emerge como un enfoque racional para este subgrupo de LMA de alto riesgo.

Las limitaciones incluyen el uso de knockdown basado en shRNA en lugar de modelos verdaderamente nulos para TP53 generados mediante CRISPR, posibles efectos inespecíficos del shRNA y el número reducido de muestras primarias de pacientes. Se requieren validaciones in vivo y estudios correlativos clínicos en pacientes con LMA mutada en TP53 tratados con BiTE para confirmar la relevancia traslacional.