Las vesículas de células madre aceleran el cierre de heridas en fibroblastos envejecidos, pero no en los jóvenes

La cicatrización de las heridas se vuelve más lenta con la edad, y se cree que una de las razones es la acumulación de células senescentes. Los fibroblastos impulsan la reparación de las heridas, por lo que restaurar su función en el tejido envejecido es un objetivo atractivo para la longevidad saludable. Las células madre mesenquimales (MSC) actúan principalmente mediante señales paracrinas, entre ellas las vesículas extracelulares (EV). Hasta ahora no se había probado si las EV derivadas de MSC pueden ayudar a la cicatrización específicamente en células senescentes.

El equipo utilizó fibroblastos pulmonares humanos primarios envejecidos mediante pases seriados hasta cuatro etapas: jóvenes (pase 15, tiempo de duplicación de aproximadamente 1 día), presenescentes (pase 40, aproximadamente 1 semana), senescentes (pase 50, 2–3 semanas) y senescentes profundas (pase 60, sin división). Las etapas se confirmaron por la ralentización del crecimiento, la morfología y la tinción de β-galactosidasa asociada a la senescencia. Las EV procedían de MSC de médula ósea humana, ya fueran naïve (nMSC) o polarizadas hacia un fenotipo antiinflamatorio con PACAP-27 (pMSC). Se aislaron mediante filtración de flujo tangencial y, según el seguimiento de nanopartículas, su tamaño era principalmente de 48–165 nm. Los fibroblastos recibieron 10^6 EV por mL durante 72 horas antes de un ensayo de hueco (herida) con inserto de silicona. El cierre se registró a diario y se resumió como área bajo la curva. La metodología también describió citometría de flujo para el ciclo celular y la muerte celular, y qRT-PCR para BCL2, ciclina D, p16, c-MET, HGF y vimentina.

Los marcadores de senescencia aumentaron de forma constante con los pases, y el cierre de la herida se ralentizó en consecuencia. El tiempo hasta el cierre se correlacionó fuertemente con la proporción de células senescentes (R = 0,925, p < 0,0001). La curva de cierre también cambió de forma: de un ajuste cuadrático en los cultivos jóvenes a un ajuste exponencial en los senescentes. Los autores interpretan esto como un cambio en las contribuciones relativas de la proliferación y la migración. Tanto las EV de nMSC como las de pMSC aceleraron de forma significativa el cierre del hueco en los cultivos senescentes, pero no en los jóvenes. Las EV de pMSC fueron más eficaces que las de nMSC (p < 0,0001 en los cultivos presenescentes y senescentes). Ambos tipos de EV redujeron el porcentaje de células senescentes en los cultivos senescentes y senescentes profundos. En los cultivos presenescentes, las EV de pMSC no tuvieron efecto sobre el número de células senescentes, mientras que las EV de nMSC lo aumentaron. El resumen atribuye el efecto más fuerte de las EV de pMSC principalmente a la migración celular.

Los resultados sugieren que las EV de MSC, especialmente las de MSC polarizadas antiinflamatorias, podrían beneficiar de forma selectiva a las células envejecidas o senescentes y dejar prácticamente sin cambios a las células jóvenes sanas. Esa selectividad resulta atractiva para un tratamiento. El resultado en las células presenescentes, en el que las EV de nMSC aumentaron el número de células senescentes, recuerda que el origen y la preparación de las EV importan.

El trabajo se realizó in vitro en un solo tipo de fibroblasto, con senescencia replicativa y un ensayo de hueco en 2D. El texto proporcionado terminaba a mitad de los resultados, por lo que no se pudieron revisar aquí los hallazgos sobre ciclo celular, muerte celular y expresión génica, ni la discusión mecanística. La carga de las EV no se describía en el texto disponible, y no se informaron datos in vivo.